材料及方法
1材料
1标本
选自1990-2000年新疆医科大学第一附属医院外科手术切除，资料详实的存档标本甲状腺乳头状癌44例及癌旁正常甲状腺组织20例年龄13-87岁平均年龄44.6+13.6岁，男性9例女性35例，所有标本均常规10%福尔马林固定石蜡包埋5m，厚连续切片HE染色所有切片经复查病理诊断无误。
2主要免疫试剂
Ecad鼠抗人单克隆抗体为北京中山公司产品PCNA单抗PC10北京中山公司产品P53单克隆抗体，Do-7为北京中山公司产品第二抗体Anti-mouselinkreagent或Anti-rabbit linkreagent北京中山公司产品第三抗体Anti-mouse stretavidin Reaagen或Anti-rabbit streptavidin Reagen北京中山公司产品2免疫组织化学染色1LSAB法labelled Streptavidin Biotin method,，抗生蛋白链菌素—生物素标记法选用有典型病理组织学结构的蜡块5m，厚连续切片于55�C烤箱12小时以上常规二甲苯脱蜡，梯度酒精水化PBS(0.01M醋酸缓冲液，PH7.4)漂洗3%H2O2水溶液室温0min，封闭内源性过氧化物酶PBS漂洗枸橼酸缓冲液于微波炉内98解冻档，抗原修复PBS漂洗滴加5%正常小牛血清,室温孵育，(阻断非特异性背景反应)滴加第一抗体80L滴加第二抗体，桥抗体80lPBS漂洗5min3滴加第三抗体，抗酶抗体80l微波炉内中低火档，5min室温孵育15min.PBS漂洗AEC显色10-15min(显微镜下控制显色时间)PBS漂洗Mayers苏木素复染20秒，甘油明胶封片2染色结果标准
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结果
1p53蛋白PCNA和Ecad表达的免疫组化形态学特征Ecad，阳性颗粒主要位于细胞膜，细胞浆，细胞核中阳性染色极少p53PCNA，均为胞核分布，为棕红色颗粒阳性细胞癌灶中多呈弥漫或片状分布，阳性细胞着色强度不完全相同，呈异质性，图1~32EcadPCNA和p53在甲状腺乳头状癌组织,正常甲状腺组织中的表达癌组织内p53PCNA阳性率分别为386%17/44明显高于非癌组织05%1/20，而阳性率癌组织为364%16/44，明显低于非癌组织100.0%(20/20)均存在显著性统计学意义(P<0.005)，表1表1EcadPCNA和p53在甲状腺乳头状癌组织正常甲状腺组织中的表达
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材料与方法…………………3
结果…………………4
讨论…………………6
小结…………………………8
讨论
研究表明，恶性肿瘤的发生演进是细胞内相关基因的异常表达调控多阶段积累的结果，利用免疫组织化学或原位杂交技术可以在组织切片上，从分子水平定位检测这些基因的变化，便于原位对比观察各基因的表达，研究它们的变化规律和联系，以深入地了解包括甲状腺乳头状癌在内的恶性肿瘤病因发病学及生物学特性粘附分子，E—cad是一种钙依赖性，存在于正常上皮细胞中以维持正常上皮细胞的极性和分化维持组织正常形态，具有特殊生物学特征，与癌细胞侵袭转移密切相关的一种上皮细胞粘附分子它是分布在所有上皮组织中的跨膜糖蛋白，分子量12KD人E-cad，基因定位于染色体，16号长臂上，主要由细胞外区跨膜区和细胞内区三部分构成，主要介导同种细胞间的粘附反应，并起细胞骨架作用具有钙依赖性，是近年来发现的新的具有临床价值的恶性肿瘤预后指标，E-cad参与细胞与细胞，细胞与细胞基质间特异性粘连过程，在细胞的粘附聚集中起着重要的作用，其活性影响着细胞间的紧密连接，缝隙连接和桥粒连接的形成，E-cad，被看作是上皮细胞选择性的粘着剂，它在细胞间直接表达形成细胞的粘附能力，调控细胞组织的全部形态，E-cad，表达减弱或丢失是细胞离散的分子基础PCNA，又称周期蛋白cylin，它是一种核内蛋白质，分子量在33KD-36KD之间，它有261个氨基酸人PCNA，基因含有9461个碱基对有6个外显子，它的出现明显与细胞增殖有在静止期，其量很少，G1，晚开始增加S期达到高峰G2M期明显下降，它是一种判断细胞增殖状态的指标，PCNA与肿瘤的分期分级预后有关P53，基因位于17号染色体短臂17P131它分为突变型和野生型野生型P53蛋白维持细胞内DNA的稳定性，抑制DNA合成和复制并消除，DNA受损的异常细胞从而抑制细胞增殖，而突变型P53蛋白由于构象发生改变，丧失了这种机制抑制异常细胞增殖能力下降，促进了肿瘤的发生发展野生型P53白的半衰期较短，不易检测突变型P53，蛋白由于突变使构象发生改变，稳定性增加且能与一些癌蛋白形成稳定复合物，使其半衰期延长并在核内积聚，能被免疫组织化学法检测，多数认为P53蛋白突变与肿瘤的发生有密切关系
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小结
1p53基因的表达伴有异常甲状腺细胞的增殖与Ecad的异常变化，在甲状腺乳头状癌的发生发展过程中具有重要作用2P53PCNAEcad基因的表达反映了甲状腺乳头状癌恶性表型的某些特点，在临床上其检测可作为诊断治疗的参考指标3Ecad，在甲状腺乳头状癌中的低表达与淋巴结转移相关，提示可作为早期预测淋巴结转移的指标此三种基因的联合检测可作为甲状腺乳头状癌的分子病理学指标，为制订合理的手术及辅助治疗方案的评价预后提供客观的参考
参考文献（略）