第1章综述
1.1引言
药物与人类的生活息息相关，有着密切的联系，是能影响人类机体生理，生化以及病理过程以及用以预防、诊断、治疗疾病的化学物质。随着科技的不断日新月异，医药行业也在迅速发展，人们在长期的医疗实践和药品生产中认识到，为了安全、有效的使用药物，有效的药品质量监管是必要的。药物含量的不足或过量，都将会导致药物治疗的无效或产生新的不良作用，甚至会产生新疾病，乃至危及生命。因此，简便、快速、准确地从复杂组分中灵敏、可靠地检测痕量药物含量及成分，对进一步了解药物在体内的各个作用过程，以及药物分子与生物体内分子的相互结合关系，减少药物的毒副作用，调整临床用药的方案和剂量提取重要的指导思想。也可借此改造药物的分子结构，提供研制疗效更好、毒性更低、作用更有效药物的可靠信息以及对禁用药的监测具有非常重要的意义。
药物分析通过釆用物理的、化学的或物理化学的理论、技术和仪器的方法，研究药物、制剂的质量控制以及药物代谢、微量禁用药的检测等相关问题的综合性应用学科，是药物科学的一个分支。常用的药物分析方法主要有紫外分光光度法、薄层色谱法、伏安分析法、气相色谱法、毛细管电泳技术、超临界流体色谱法、高效液相色谱法、以及各种检测方法分别与流动注射分析技术、高效液相色谱相结合等。因突光法具有灵敏度高、选择性好等优点，在药物分析中与高效液相结合的应用越来越多，对药物的分离和检测具有十分重要的意义。
1.2荧光法在药物分析中的应用
荧光分析法具有高的灵敏度，好的选择性等特点，在药物分析中具有重要的作用。但大多数的药物分子不具有或只具有弱的天然突光，在很大程度上限制了劳光法的使用。为了解决常规突光分析法存在的诸多问题，使突光分析法的应用更加广泛，近年来，发展了各种新型突光分析技术，如突光粹灭法、光化学突光法、间接突光法、衍生化突光法、基于化学反应突光法、催化动力学突光法以及与色谱、流动注射技术联用等，以此扩大了焚光分析法在药物分析中的应用。下面简单介绍几种在药物分析中常用到的突光分析方法：
1.2.1直接荧光分析法
部分药物本身具有天然焚光，可通过药物本身的焚光强度的变化来直接运用突光法测定其浓度和含量。邵爽利用突光分析法研究了环丙沙星的突光行为，并考察了醋酸-醋酸钠缓冲溶液酸度、温度以及放置时间对突光强度的影响，对片剂实样和滴眼液中环丙沙星的含量分别进行了测定。P. Damiani等根据奈普生本身的荣光强度，直接突光法对药片中的奈普生含量进行了测定，取得了很好的效果。
1.2.2同步焚光分析法
同步焚光分析法是指同时扫描焚光激发和发射两个单色器波长，测得结果由测得的劳光强度信号与对应的发射波长（激发波长）构成。与直接突光分析法相比，简化了谱图、提高了选择性、减少了干扰，还可以同时检测多种物质。万益群等研究发现生物蝶呤、黄蝶呤、蝶呤-6-梭酸、新蝶呤、异黄蝶呤等几种蝶呤类化合物的突光信号相互重叠，相互干扰，利用同步突光分析法有效的检测了尿液中异黄蝶呤的含量[4]。同样陈培珍等发现焚光素-溴化十六院基三甲基按-阿米卡星体系利用普通突光法检测，激发光谱与发射光谱相互重叠，干扰严重，新建立了一种以焚光素-二聚体焚光探针同步突光光谱技术分析阿米卡星含量的方法。
第2章在线氧化衍生-HPLC荧光法测定甲氨蝶呤.......19
2.1实验仪器及试剂....21
2.1.1实验仪器.......21
2.1.2实验试剂.....21
2.2实验原理.......22
2.3实验方法.......22
2.3.1溶液的配制及样品处理......22
2.3.2固相反应器的制备.....23
2.3.3分析方法......23
2.4结果与讨论.....24
2.4.1测定甲氨蝶呤波长的选择.......24
2.4.2固相反应器的选择....24
2.4.3流速的选择.......25
2.4.4色谱流动相的选择......25
2.5样品分析.......29
2.5.1甲氨蝶呤片剂含量的测定.......29
2.5.2血样中甲氨蝶呤含量的测定.......30
第3章在线氧化衍生-HPLC荧光法同时测定三种药物......33
3.1实验仪器及试剂........35
3.2实验方法......36
3.3结果与讨论........38
3.4样品分析............42
3.5 小结..........43
总结..........45
参考文献........47
总结
本研究论文依据一种衍生反应-氧化还原反应，使不具有或只具有弱的劳光的药物分子失去部分基团后转变为共辄的强焚光产物的原理。运用HPLC结合二氧化铅固相反应器在线氧化荣光检测技术测定药物中的甲氨蝶呤；并与固相萃取技术联用分析血样中甲氨蝶呤的含量；同时分析了混合样品中的三种药物，氯丙嗪、盐酸硫利达嘆和氯普噻吨。通过HPLC在线氧化突光检测法分别对甲氨蝶呤和三种混合药物体系进行了研究，得出以下结论：
1.氧化还原反应可使一些本身不具或只具有弱天然劳光的药物衍生成强突光产物。
2.HPLC与固相反应器联用，操作简便，可以连续进样，实现自动化，重复性好，不需要附加输液栗，减少色谱分析的死体积的增加。而且经色谱柱分离后再进行衍生可实现各种分析物的更好的分离。固相反应器也有反应试剂集中，使反应更加完全的优点。
3.固相萃取技术与HPLC在线氧化焚光分析法相结合，可成功用于血样中药物含量的测定，该方法准确度高、重现性好、几乎无干扰、回收率高等优点。
4.HPLC的一大优点是选择性好，可实现多种化合物的同时分析，本研究利用HPLC在线氧化突光分析法同时分析氯丙嚷、盐酸硫利达嗪和氯普噻吨三种精神类药物，对每种化合物的灵敏度都很高，测定重现性好和操作自动化程度高。
参考文献
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