引言
癌症（Cancer),也称为恶性肿瘤（Malignant Neoplasm)，是由于控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞最大的特点就是能够不受控制、永无止境地进行增殖，并且很容易发生转移，迅速扩散至全身各个器官，使人体产生一系列不良反应：失眠、乏力、食欲降低、抑郁以及贫血等，严重的还能引起组织、器官的结构和功能的损坏，最终癌症患者会因脏器衰竭而死亡。不久以前，癌症被认为是西方高收入、工业化国家的专有疾病，但是，随着癌症风险因素从西方发达国家输入到资源贫乏的国家中，使得现今大部分癌症新发病例发生在中、低资源水平国家，也就是说癌症正在全球化发展。在中国，据卫生部统计，目前我国每年癌症患者人数约300万，新发病人数约180万，每年死于癌症的病人约130万，发病率每年以3%~5%的速度递增，未来仍呈明显上升趋势。癌症彳严然已经成为人类生存的头号杀手。
尽管癌症是一种很难治愈的疾病，但并不是得了癌症就会被宣判死亡，在科学高速发展的今天，我们有理由相信癌症并非不治之症。自从进入20世纪，采用手术、化疗、放疗来治疗癌症，已经取得了重大突破，但是这些手段仍然存在很大的局限性，整体治疗满意度并不好。主要原因是一些细胞毒素的副作用以及肿瘤的遗传异质性等导致很多手术、化疗治疗效果并不好。而药物控制释放系统恰好能够增强药物的疗效同时通过控制释放时间与释放位点来降低药物的毒副作用。近年来，纳米粒载体在药物控制释放领域起着主导作用，纳米载药系统主要的优点是：纳米粒载体多具有超微尺寸这样可以避免巨哩细胞的吞唾，有效穿透毛细血管壁，实现长时间循环；能有效进入细胞和组织间隙，进一步勒1向肝、肺、脊髓、脾和淋巴等器官；载体材料可生物降解或具有pH敏感、氧化还原敏感或者温度敏感响应，从而实现药物的控制释放，改善药物生物利用效率，减少药物的毒副作用。两亲性聚合物因其独特的两亲性结构，可以在水溶液中进行自组装形成多种形式的聚集体，如胶束、凝胶、囊泡_等，这些聚集体对细胞膜有良好的渗透性，并且能够通过自组装有效的将模型药物包裹在里面，因此成为重要的药物载体材料，尤其是疏水改性天然多糖自组装形成的两亲性聚合物，它们作为纳米药物载体具有很多得天独厚的优势，因而Fl渐受到科学家们的关注。但有关普鲁兰多糖疏水改性作为药物载体的报道还比较少。本文将以普鲁兰多糖作为骨架，对其进行硬脂酸疏水修饰，合成两亲性的聚合物，并探索其作为纳米药物载体的可行性。
1 文献综述...........2
1.1纳米技术在药物传递系统中的应用...........2
1.2 天然多糖作为纳米药物载体研究进展...........8
1.3普鲁兰多糖作为药物载体在纳米载药系统中...........13
1.3.1普鲁兰多糖简介...........13
1.3.2普鲁兰多糖衍生物作为纳米药物载体研究进展...........14
1.3.3普鲁兰多糖衍生物在其他生物医学领域的应用...........15
1.4本论文的选题依据...........16
1.5本论文的研究内容...........17
2硬脂酸疏水改性普鲁兰多糖衍生物(PUSA)的合成及其自组装水凝胶........19
2.1 引言...........19
2.2试剂及仪器...........19
2.2.1主要试剂...........19
2.2.2仪器设备...........19
2.3实验方法...........20
2.3.1硬脂酸疏水改性普鲁兰多糖衍生物（PUSA)的合成...........20
2.3.2普鲁兰多糖及其衍z上物的傅叶变换红外光谱(FTIR)表征.....21
2.3.3普鲁兰多糖及其衍生物的核磁 NMR表征...........21
2.4结果与讨论...........22
2.4.1 普鲁兰多糖与PUSA衍生物的FTIR农征...........22
2.4.2普鲁兰多糖及其衍生物的核磁表征...........23
2.4.3制备方法对纳米粒形成及粒径大小的影响.........24
2.4.4 PUSA t丨绀装纳米水凝胶临界胶朿浓度(CMC)的测定.........24
2.4.5透射屯镜(TEM)观察纳米粒形态.........26
2.4.6动态光敗射CDLS)法测定纳米粒粒.........27
3PUSA战药纳米粒的介成、及征U休外释放.........29
3.1引言.........29
3.2试剂及仪器.........30
3.3实验方法.........30
3.4结论........32
4 PUSA/DOX载药纳米粒的体外细胞实验研究.........44
4.1 引言.........44
4.2材料、试剂及仪器.........44
4.2.1实验材料.........44
4.2.2主要试剂.........44
4.2.3仪器设备.........45
4.3实验方法.........45
4.3.1细胞的复苏及培养.........45
4.3.2 MCF-7细胞对载药纳米粒摄取的定性分析.........45
4.3.3 MCF-7细胞、SMMC-7721细胞对载药纳米粒摄取的定量分析.......46
4.3.4细胞毒性实验.........46
4.3.5统计分析.........47
4.4结果与讨论.........47
结论与展望.........58
参考文献.........59
结论与展望
结论
1.成功合成了硬脂酸疏水改性的普鲁兰多糖衍生物PUSA、PUSA2,R对其结构进行了表征。同时制备了 PUSA组装的纳米粒，川透财电镜(TEM)、动态激光粒度仪(DLS)表征了透析法制flWKj PUSA 组装颗粒的形态和粒径。结果表明PUSA自组装纳米粒成均匀球形分布，粒径在80-160nm之一随芯硬脂酸取代度的增大，粒径不断减小。
2.以抗肿瘤药物阿霜素（DOX)为模型药物，々察战药纳米粒的不同制备方法、不同摩尔量三乙胺脱盐酸、不同取代度的PUSA、不同药物/载休的比位对载药:及仗財率的影响。结论：表明三乙胺脱盐酸的最佳用药设为药物搜尔泣的仿；他条件相M的载药纳米粒的战药M和封率随PUSA >11硬脂峻収代度if)大而增大；扣M取代度的PUSA材料的载药ft随药物/载体比值的增大而墙大，似針率却随药战比的僧大I(IJ减小。药物释放结架表IJ/j在pH = 7.4(人体m常组织的pH他的PBS溶液屮，PUSA的纳水对DOX具有良好的缓释效果，且随接枝量的增加，缓释效见僧: pH<6.8(肿瘤組织的pH值）时，PUSA纳米粒子释药速度加快，表现出一定pH敏感件肿瘤祀向件。
3.细胞毒性实验表明空白八载体本无打好的物和容性。细胞摄取实验结果表明SMMC-7721细胞和MCF-7细胞对战药纳米粒的极取序<均A.于游离的药物，并SMMC-7721细胞对载药纳米粒的摄収效率远远 MCF-7细胞对载药纳米粒的摄取效率，说1W PUSA衍斗：物只?打明W.的肝肥iMft。W此硬脂酸改性的多糖装纳米粒m成为一种新的沿价位的肝把药物载体。
展望
1.进一步探索纠正细胞对战约纳米粒的扱取机制，进行激光骑，同时也能对战药纳米料逊入细胞的位置进行追踪。
2.进行活体动物实验，进一步评价载体的安全性及肿瘤的靶向性。
参考文献
[1]杨华娟.肝癌组织中微量元素的分析[D].长沙：中南人学湘雅二医院肿瘤科，2008.
[2]Louise Potterton.癌症的全球化[N].国际原子能机构通报，2010, 4，51 (2).
[3]周翠娥.癌症的预防与治疗进展[J].实fU医技染志，2010，17(6):537-538.
[4]邓超干，关雄泰，陈素珍.胃癌与微呈元素相关性研究[J].广/j、微量元素科学，2001,8(6) :32-35.
[5]马小花.宵癌、乳腺病患者体内微量元素与疾病相关性初步研究[D].兰州:兰州大学药学院 2011.
[6]Xiong Xiao-Bing， Ma Zengshuan， Raymond L， et al. The therapeutic response tomultifunctional polymeric nanoconjugates in the targeted cellular and subcellulardelivery of doxorubicin [J]. Biomaterials, 2010, 31 (4):1-12.
[7]Zhang Haitao, Li Fei, Hong Wu, et al. Folate-decorated maleilated pullulan-doxorubichttp://www.1daixie.com/dxyxlw/in conjugate for active tumor-targeted drug delivery [J]. EuropeanJournal of Pharmaceutical Sciences, 2011, 42(5): 517-526.
[8]Zhang Zhi-hong，Cao Wei-guo, Jin Hong-lin, et al. Biomimetic nanocarrier for directcytosolic drug delivery [J]. Angewanclte, 200903112.
[9]Jun T，Kamm W, Breitenbach A, et al. Biodegradable nanoparticles for oral deliveryof peptides: is there a role for polymers to affect mucosal uptake? [J]. Eur J PharmBiopharm, 2000， 50: 147-160.
[10]Williams M，Flintoff F. Isolation of a human cDNA that complements a mutant hamstercell defective in ethotrexate uptake[j]. BioChem, 1995，270: 2987-2992.