本文是一篇医学论文，笔者通过本研究发现，虽然FID-1、FID-2两组测量结果相关且一致性良好，但两组均值存在差异，使用的双柱双检测系统存在系统误差，因此在后续研究中有必要进一步分析产生系统误差的原因及其影响。
第一部分实际案件血液样本检测乙醇含量结果的一致性分析
1材料与方法
1.1样本来源
选取2017年-2018年交警送检的实际案例血样进行检测，共162例。
1.2实验仪器、试剂
1.2.1仪器：
GC2010Plus+HS-20顶空气相色谱仪(日本，Shimadzu,带双FID检测器、双毛细管柱）；
超纯水系统（美国，密理博Direct-Q5）；Vorlex3000漩涡震荡器；
精密移液器（美国，20-200ul、100-1000ul，Thermo Fisher Scientific）；
1.2.2试剂：
99.5%叔丁醇（色谱纯，德国CNW公司）；
99.7%乙醇（色谱纯，上海安谱）
1.3样品配制
取叔丁醇加入纯水，配制4.0mg/100mL叔丁醇（内标）工作液。同一血样共配制两个样品作为平行样检测。吸取100ul待测全血，分别加入20mL顶空瓶内，各加入500ul叔丁醇工作液。立即盖上硅橡胶垫、铝帽，用密封钳密封、漩涡震荡器混匀。将上述样品放入HS20自动进样器仪器盘中待检。
1.4实验样品检测
按标准[36]进行，样品经同一进样口进样，通过十通阀转换分别经过两个定量环引入不同色谱柱，后分别进入1号、2号FID检测器（FID-1、FID-2）进行检测。同一样本一次进样分别获得两个结果FID1-1和FID2-1。同一样品第二次进样共获得两组结果分别为FID1-2，FID2-2。
2.结果
2.1工作曲线
工作曲线方程为：FID-1：Y=(0.0591924)X+(-0.0519011）(r=0.9997594)，FID-2：Y=(0.0607146)X+(-0.0794029）(r=0.9997752)。Y为乙醇与叔丁醇的峰面积比值，x为乙醇工作溶液浓度mg/mL。本标准各化合物检出限均为0.01mg/mL，定量下线均为0.05mg/mL。FID-1（DB-ALC1）、FID-2（DB-ALC2）色谱图见图1。
2.2分析结果FID-1组AC平均浓度为145.90mg/100mL，以100-125mg/100mL浓度分布最多，呈负偏态分布。FID-2组AC平均浓度结果为148.60mg/100mL，以100-125mg/100mL浓度范围分布最多，呈负偏态分布。结果见图2。RSD和双样相差均为负偏态分布，双样相差最大值5.73%小于标准要求的10%，RSD最大值4.05%小于标准要求的5%见图2。结果均符合标准
第二部分实验样本一致性分析及结果报告
1 材料与方法
1.1实验仪器、试剂
1.1.1仪器：
GC2010Plus+HS-20顶空气相色谱仪(日本，Shimadzu,带双FID检测器、双毛细管柱）；
超纯水系统（美国，密理博Direct-Q5）；Vorlex3000漩涡震荡器；精密移液器（美国，20-200ul、100-1000ul，Thermo Fisher Scientific）；
1.1.2试剂：
99.5%叔丁醇（色谱纯，德国CNW公司）；
99.7%乙醇（色谱纯，上海安谱）
1.2样本配制
以纯水为基质，配制实验样本浓度为80mg/100mL样本20例。取适量乙醇、叔丁醇加入纯水，分别成配制成80 mg/100mL乙醇溶液、4.0 mg/100mL叔丁醇（内标）工作液。精密吸取乙醇工作溶液0.10 mL、叔丁醇工作液0.50 mL至20mL顶空瓶中，立即盖上硅橡胶垫及铝帽，后用密封钳密封，漩涡振荡器混匀。共配制20个样品并检测[38]。将样品放入HS20自动进样器仪器盘中待检。
1.3实验样品
检测按标准[30]进行，样品经同一进样口进样，通过十通阀转换分别经过两个定量环引入不同色谱柱，后分别进入1号、2号FID检测器（FID-1、FID-2）进行检测。
2结果
2.1工作曲线方程
结果见第一部分2.1工作曲线。
2.2样品检测结果
FID-1组AC为（79.57±1.65）mg/100mL，中位数浓度79.23mg/100mL，RSD为2.07%；FID-2组AC结果为（81.42±1.33）mg/100mL，中位数浓度81.53mg/100mL，RSD为1.63%。FID-1、FID-2组AC结果的RSD均未超过5%，小于标准要求的10%。FID-1组结果提琴散点图中间饱满，上下部逐渐缩窄。检测结果30%的点分布在80 mg/100mL线之上。FID-2组结果中间饱满，上下部逐渐缩窄。80%的点分布于80mg/100mL线之上。见图10。
第三部分讨论………………………27
第四部分结论………………………33
第三部分讨论
3.1关于结果一致性及评价方法的选择
本次研究中首先选用实际案件的血样进行检测，符合实际检案场景。在实际案例中血醇浓度分布随机，事前检测者不知道其真实值。但在前述实验中真实案件中血液作为溶质，因为基质效应[41]的存在，有可能对血中乙醇浓度的检测带来一定干扰。同时，真实案件数据分布较广，随着浓度范围增加，容易产生比例误差，从而导致分析的假阴性或假阳性。因此单一使用案件血液作为研究对象，可能会存在一定误差。为排除上述两个因素的影响，因而有必要以纯水为基质，通过配制固定乙醇浓度的真实案件组来进一步分析和验证。
本研究中FID-1、FID-2组检测AC结果经配对t检验分析，差异具有统计学意义（t=-7.69，P＜0.001），表明FID-1、FID-2测量AC的结果可能存在不一致。配对t检验进行结果比较时，通过检验“差异性”来推断“一致性”[38]。它主要比较均数间的差异，当不拒绝原假设时，反映总体均数可能相同。同时配对t检验容易发现系统误差，却对随机误差的检出较低[39]，因此检验无法真实反映数据间的一致性。配对t检验容易检测出大样本量之间的微小差异，但这样的差异并没有专业意义。所以不能根据配对t检验结果判断FID-1、FID-2测量AC的结果是否一致。
第四部分结论
4.1双柱双检法结果一致性：
使用双色谱柱双FID检测样本中AC，结果一致性良好。
4.2结果一致性方法的选择
推荐联合使用Bland-Altman图分析法、ATE/LER区域法和ICC作为双柱双检法检测样本中乙醇浓度的一致性评价方法。
4.3最终结果报告
双柱双检法中，推荐使用FID1连续检测同一样本的均值作为最终定量结果。
参考文献（略）